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用微生物發(fā)酵法提取DHA工藝及技術(shù)簡(jiǎn)介

發(fā)布時(shí)間:2022-01-15   瀏覽:2900次

摘要:DHA初是從海洋生物中發(fā)現(xiàn)與提取的。隨著技術(shù)進(jìn)步,人們逐步掌握了,利用微生物發(fā)酵的方法,來提取、濃縮,得到高品質(zhì)的DHA。本文著重介紹,用溶劑法提取由微生物發(fā)酵(隱甲藻)得到DHA方法與工藝過程。

  關(guān)鍵詞:DHA、微生物發(fā)酵、藻油、溶劑法、提取

  1前言

  DHA(Docosahexaenoicacid,22:6△4.7.10.13.16.19,全名二十二碳六烯酸)是一種重要的長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸(polyunsaturatedfattyacid,簡(jiǎn)稱PUFA),屬于ω-3系列(分子結(jié)構(gòu)式中個(gè)雙鍵位于-COOH基團(tuán)反側(cè)的第三個(gè)鍵上,即ω-3系列)。人和其它哺乳動(dòng)物只有△4、△5、△6及△9去飽和酶,缺乏△9以上的去飽和酶,因此無法自身合成DHA,必須由食物來提供。

  自上世紀(jì)90年代以來,DHA一直是兒童營(yíng)養(yǎng)品的一大焦點(diǎn)。英國(guó)腦營(yíng)養(yǎng)研究所克羅夫特教授和日本營(yíng)養(yǎng)學(xué)家奧由占美教授早揭示了DHA的奧秘,他們的研究結(jié)果表明:DHA是人的大腦發(fā)育、成長(zhǎng)的重要物質(zhì)之一。DHA作為一種脂肪酸,其增強(qiáng)記憶與思維能力、提高智力等作用更為顯著。研究發(fā)現(xiàn),體內(nèi)DHA含量高的人的心理承受力較強(qiáng)、智力發(fā)育指數(shù)也高。

  鑒于對(duì)DHA的認(rèn)識(shí)不斷加深,開發(fā)利用DHA技術(shù)不斷進(jìn)步,如何得到高品質(zhì)、高含量的DHA,一直是人們追求的目標(biāo)?,F(xiàn)在,利用微生物發(fā)酵(隱甲藻)可得到50%的出油率,用正己烷萃取調(diào)配好的發(fā)酵液,在低溫下濃縮,經(jīng)精制后,可得到含量占總油40~45%的DHA。

  2工藝過程

  發(fā)酵。

  第二提取工藝過程,這里主要介紹萃取工藝:

  正己烷

  ↓加熱┌→菌渣二次處理

  發(fā)酵液→脫水濃縮→萃取罐→破壁→快速攪拌→靜止→上清液→低溫真空濃縮→富含DHA脂溶性液體

  2.1、發(fā)酵液脫水濃縮。發(fā)酵液內(nèi)含有大量的水(90%以上),首先要脫水。不脫水菌液體積大,占用萃取罐空間大,就需要增加萃取罐的體積,也相應(yīng)增加了投資成本。目前,根據(jù)我們轉(zhuǎn)讓技術(shù)的使用廠家來看,主要有兩種:陶瓷膜過濾、離心機(jī)分離。

  陶瓷膜過濾:膜過濾技術(shù)是現(xiàn)代分離技術(shù)領(lǐng)域的分支,主要作用是從氣相或液相物質(zhì)中去除(截留)膠體、細(xì)菌和固體物質(zhì),以達(dá)到凈化、分離和濃縮等工藝的目的。濾膜具有膜面光滑、無碎屑、厚度薄、吸附濾液少、孔隙率高、微孔結(jié)構(gòu)均勻、過濾效果好和過濾速度快等諸多優(yōu)點(diǎn),現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用于食品飲料、醫(yī)藥、化工、電子、能源、環(huán)保和檢驗(yàn)等領(lǐng)域。過濾的方式包括正壓和負(fù)壓過濾,均是使水和較小顆?;蚍肿拥娜苜|(zhì)能通過一定孔徑的濾膜,大的顆?;蚍肿尤苜|(zhì)則不能透過,從而使大顆?;蚋叻肿游镔|(zhì)脫水、濃縮,提高檢出率的目的[1]。

  膜過濾剛開始使用效果很好,過濾也快。但使用幾個(gè)小時(shí)后,發(fā)現(xiàn)過濾速度、過濾效果都不如前。造成藻油孢子破碎,油乳化嚴(yán)重。分析原因:過濾一段時(shí)間后,可能是部分菌體或其它物質(zhì)堵塞了濾孔,增加了輸送泵的負(fù)荷、泵體對(duì)發(fā)酵液的剪切,造成藻油孢子破裂。

  離心脫水:碟式分離機(jī)是沉降式離心機(jī)中的一種,用于分離難分離的物料。

  碟式分離機(jī)是立式離心機(jī),轉(zhuǎn)鼓裝在立軸上端,通過傳動(dòng)裝置由電動(dòng)機(jī)驅(qū)動(dòng)而高速旋轉(zhuǎn)。轉(zhuǎn)鼓內(nèi)有一組互相套疊在一起的碟形零件--碟片。碟片與碟片之間留有很小的間隙。懸浮液(或乳濁液)由位于轉(zhuǎn)鼓的進(jìn)料管加入轉(zhuǎn)鼓。當(dāng)懸浮液(或乳濁液)流過碟片之間的間隙時(shí),固體顆粒(或液滴)在離心機(jī)作用下沉降到碟片上形成沉渣(或液層)。沉渣沿碟片表面滑動(dòng)而脫離碟片并積聚在轉(zhuǎn)鼓內(nèi)直徑大的部位,分離后的液體從出液口排出轉(zhuǎn)鼓。碟片的作用是縮短固體顆粒(或液滴)的沉降距離、擴(kuò)大轉(zhuǎn)鼓的沉降面積,轉(zhuǎn)鼓中由于安裝了碟片而大大提高了分離機(jī)的生產(chǎn)能力。積聚在轉(zhuǎn)鼓內(nèi)的固體在分離機(jī)停機(jī)后拆開轉(zhuǎn)鼓由人工清除,或通過排渣機(jī)構(gòu)在不停機(jī)的情況下從轉(zhuǎn)鼓中排出。

  碟式分離機(jī)可以完成兩種操作:液-固分離(即底濃度懸浮液的分離),稱澄清操作;液-液分離(或液-液-固)分離(即乳濁液的分離),稱分離操作。

  離心機(jī)分離,能很好解決乳化現(xiàn)象,但是如調(diào)節(jié)不好,會(huì)再排出水的同時(shí)帶走部分藻油孢子,造成不必要的損失。

  此道工藝能脫去35~50%的水。

  2.2、萃取。萃取的方法有兩種:一是萃取罐內(nèi)先加入準(zhǔn)備放入菌液2~3倍體積的正己烷(溫度≤50℃),再投入破過壁的菌液,邊投入邊攪拌(攪拌速度45r.p.m左右)。菌液投完后,再攪拌5min,然后靜止分離。

  第二種方法是萃取罐內(nèi)先投入一定量的菌液,再加入一定量的破壁劑,攪拌破壁。然后,加入2~3倍體積的正己烷(溫度≤50℃),快速攪拌(攪拌速度60r.p.m左右)10min,使菌液與溶劑深度混合,然后靜止分離。

  分離后,要么把下邊的菌渣打入另一個(gè)萃取罐進(jìn)行第二次萃??;要么把上清液抽走,再投入溶劑進(jìn)行第二次萃取。上清液放入混和油暫存罐,靜止、分離。重相部分投入萃取罐,萃取用;輕相部分,則低溫濃縮、蒸發(fā)。

  萃取時(shí),加入溶劑的多少、攪拌速度及時(shí)間是重要參數(shù),應(yīng)根據(jù)小試來掌握。如控制不好,可能會(huì)出現(xiàn)乳化現(xiàn)象。一旦出現(xiàn)乳化現(xiàn)象,就用90°以上的酒精來破乳。

  現(xiàn)在,我們根據(jù)實(shí)際需要,又設(shè)計(jì)出了一套連續(xù)萃取DHA工藝。它不僅提高了產(chǎn)量,減少了投資成本;同時(shí),提高了產(chǎn)品質(zhì)量,降低了勞動(dòng)強(qiáng)度,是今后生產(chǎn)的工藝。

  2.3、破壁。我所接觸提取DHA工藝中,采用破壁的方法主要是:機(jī)械法、化學(xué)法兩種。

  機(jī)械法為物理法,靠機(jī)械能來達(dá)到破壁的效果。主要采用研磨法、高壓均質(zhì)法。在破壁的時(shí)候,由于沒有及時(shí)與溶劑接觸,會(huì)造成油粒與水混合,在外力作用下發(fā)生乳化。

  化學(xué)法主要為酶溶解法。它能破壞細(xì)胞壁,釋放細(xì)胞內(nèi)的油粒。

  破壁效果,要在顯微鏡下觀察,酶蛋白法的破壁率能達(dá)到100%。

  2.4、濃縮。濃縮根據(jù)產(chǎn)量大小可分為間歇式、連續(xù)式兩種。要求溫度≤50℃;真空度在-0.085MPa以上。

  用以上工藝生產(chǎn)出來的DHA總毛油量為:12.5g/L發(fā)酵液以上;含量(相對(duì))40~45%左右;酸價(jià)5.6mgKOH/g左右;色澤鮮紅的流體。

  DHA等含量分析表[2]

  總結(jié):用正己烷溶劑法生產(chǎn)DHA是一個(gè)成熟的工藝,我們已在國(guó)內(nèi)承建三家企業(yè),各家均取得了良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。為國(guó)民素質(zhì)提高及下一代智力水平的提高,做到了應(yīng)有的貢獻(xiàn)。

  參考資料

  [1]寧培勇等濾膜過濾技術(shù)應(yīng)用研究進(jìn)展[期刊論文]-中國(guó)消毒學(xué)雜志2006(1)


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